產(chǎn)品名稱:土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣
產(chǎn)品貨號:LE-1-031,LE-2-031
免費(fèi)咨詢:0551-66107970
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
檢測方法 |
規(guī)格 |
售價(元) |
LE-1-031 |
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)測試盒 |
可見分光光度法 |
50管/24樣 |
900 |
LE-2-031 |
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)測試盒 |
微量法 |
100管/48樣 |
1700 |
測定意義
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細(xì)菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解
的關(guān)鍵酶,產(chǎn)物木糖可作為碳源應(yīng)用于微生物發(fā)酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應(yīng)用于造紙工業(yè),比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保,具有廣泛的應(yīng)用價值。
測定原理
S-β-XYS 催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產(chǎn)生對硝基苯酚,對硝基苯酚在 405nm 處有特征吸收峰,測定 405nm 光吸收增加速率,可計(jì)算 S-β-XYS 活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 2mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/strong>
約 0.1g 鮮土或風(fēng)干土樣,加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿,室溫振蕩提取 30min,然后 10000g, 4℃,離心 10min,取上清待測。
測定操作表:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長至 405nm。
2、操作表
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對照管 |
測定管 |
樣本(μL) |
200 |
200 |
試劑一(μL) |
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50 |
試劑二(μL) |
400 |
350 |
混勻,45℃水浴 20min |
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試劑三(μL) |
400 |
400 |
混勻,靜置 5min,405nm 處測定吸光值 A,計(jì)算 ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設(shè)一 個對照管。 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/mL),y 為吸光值ΔA。酶活定義:每克土樣每天催化產(chǎn)生 1μmol 對硝基苯酚的酶量為一個酶活單位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土樣)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V 樣總:加入提取液體積,1mL; V 反總:反應(yīng)總體積,0.6mL;V 樣:反應(yīng)中樣品體積,0.2mL; W:樣品質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,20min=1/72d;
ΔA 控制在0.01-2 范圍內(nèi),若ΔA 大于2,可適當(dāng)減小樣本量。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為:0.01μmol/mL-0.5μmol/mL。
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