產(chǎn)品名稱:土壤植酸酶試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣
產(chǎn)品貨號(hào):LE-1-048,LE-2-048
免費(fèi)咨詢:0551-66107970
貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
檢測(cè)方法 |
規(guī)格 |
售價(jià)(元) |
LE-1-048 |
土壤植酸酶測(cè)試盒 |
可見(jiàn)分光光度法 |
50管/24樣 |
570 |
LE-2-048 |
土壤植酸酶測(cè)試盒 |
微量法 |
100管/48樣 |
990 |
測(cè)定意義
植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。
測(cè)定原理
植酸酶在一定溫度和 pH 值條件下,水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物,無(wú)機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在 700nm 處有特征吸收峰,根據(jù) 700nm 處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,甲苯(不允許快遞)。
試劑的組成和配制
緩沖液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1 瓶,4℃避光保存, 臨用前加緩沖液30mL 配制,現(xiàn)用現(xiàn)配;用不完的試劑4℃保存一個(gè)月。
試劑二:液體 30mL×1 瓶,4℃保存。
顯色劑:粉劑×6 瓶,4℃避光保存, 臨用前根據(jù)用量每瓶加1mL 雙蒸水溶解,再加4mL 試劑二混勻。
樣本處理
新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干,過(guò) 30~50 目篩。
測(cè)定操作表
|
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
樣本(g) |
0.06 |
0.06 |
甲苯 |
40 |
40 |
振蕩混勻,室溫放置 15min |
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緩沖液(μL) |
1000 |
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試劑一(μL) |
|
1000 |
混勻,37℃孵育 24h,10000g,4℃離心 5min,取上清 |
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上清 |
500 |
500 |
顯色劑(μL) |
500 |
500 |
混勻,靜置 15min,測(cè)定 700nm 處吸光值,△A=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.759x + 0.0084,R2 = 0.9977;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/mL),y 為吸光值△A。
酶活性定義:在 37℃,pH5.5 的條件下,每克土樣每小時(shí)從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放出 1μmol 的無(wú)機(jī)磷為一個(gè)酶活力單位。
植酸酶活性(μmol/d /g 土樣)=(△A-0.0084)÷1.759×V 反總÷W÷T
=9.84×(△A-0.0084)
V 反總:反應(yīng)總體積,1.04mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1d;W:樣本質(zhì)量,0.06g。
注意事項(xiàng)
1、顯色劑需要臨用前根據(jù)用量配制,每一瓶是 5 個(gè)樣本的用量,新配制的顯色劑若有顏色則已經(jīng)污染或者試劑過(guò)期,應(yīng)放棄使用。
2、ΔA 線性范圍為 0.01-1。
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