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植酸（Phytic acid）含量試劑盒說明書（分光光度法）

貨號：LE-1-381

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

植酸又稱肌酸、環(huán)己六醇六全-二氫磷酸鹽，它主要存在于植物的種子、根干和莖中，其中 以豆科植物的種子、谷物的麩皮和胚芽中含量最高。植酸作為螯合劑、抗氧化劑、保鮮劑、 水的軟化劑、發(fā)酵促進(jìn)劑、金屬防腐蝕劑等，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、油漆涂料、日用化工、 金屬加工、紡織工業(yè)、塑料工業(yè)及高分子工業(yè)等行業(yè)領(lǐng)域。

測定原理：

磺基水楊酸-氯化鐵溶液顯紫紅色，在 500nm 下有最大吸光值。在 pH6.0-6.5 的環(huán)境下，植酸和鐵離子結(jié)合使溶液顏色變淡，測定吸光度的降低來檢測植酸含量。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、烘箱、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、金屬震蕩儀、蒸餾水

試劑的組成和配制：

試劑一：60ml×1 瓶，4℃保存；

試劑二：30mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：50mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：15mL×1 瓶，4℃保存。

植酸提取：

樣本烘干，粉碎過篩，稱取 0.05g，加入 1mL 試劑一，震蕩提取 2h；8000g，25℃離心 10min， 取上清 0.5mL，加入 0.5mL 試劑二，混勻后 4℃靜置 2h ，離心取上清待測。

測定步驟

1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 500nm，蒸餾水調(diào)零。

2、測定管：取 100μL 上清，加入 900μL 試劑三，混勻后取 750μL 加入 1mL 玻璃比色皿， 再加入 250μL 試劑四，充分混勻后500nm 下測定吸光值 A1。

3、空白液的配制：取 0.5mL 試劑一和0.5mL 試劑二混勻。

4、空白管：取 100μL 空白液，加入 900μL 試劑三，混勻后取 750μL 加入 1mL 玻璃比色皿， 再加入 250μL 試劑四，充分混勻后500nm 下測定吸光值 A2。ΔA=A2-A1?？瞻坠苤灰鲆还堋?nbsp;

植酸含量計算：

標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線為：y =0.5x + 0.0854，R² = 0.9982；X 為植酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/mL）， y 為吸光值 ΔA(A2-A1)。

植酸含量(mg/g 干重)= (ΔA-0.0854）÷0.5×V 樣總÷W×660÷1000 

=2.64× (ΔA-0.0854）÷W

V 樣總：加入提取液總體積，2mL；W：樣本干重，g；660 ，植酸分子量

注意事項：若 ΔA 高于 0.3，說明樣本植酸濃度過高，需要加空白液適當(dāng)稀釋，并在計算結(jié)果中乘以相 應(yīng)的稀釋倍數(shù)。