產(chǎn)品名稱:土壤中性木聚糖酶測(cè)試盒/土壤中性半纖維素酶試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣
產(chǎn)品貨號(hào):LE-1-052,LE-2-052
免費(fèi)咨詢:0551-66107970
貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
檢測(cè)方法 |
規(guī)格 |
售價(jià)(元) |
LE-1-052 |
土壤中性木聚糖酶測(cè)試盒/土壤中性半纖維素酶測(cè)試盒 |
可見分光光度法 |
50管/24樣 |
410 |
LE-2-052 |
土壤中性木聚糖酶測(cè)試盒/土壤中性半纖維素酶測(cè)試盒 |
微量法 |
100管/48樣 |
750 |
土壤中性木聚糖酶(Soil Neutral Xylanase, S-NEX)測(cè)定試劑盒說明書(可見分光光度法)
測(cè)定意義
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素 酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及 β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進(jìn) 有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng) 用于釀造和飼料工業(yè)中,NEX 一般分離自最適生長(zhǎng) pH 為 6-8 的微生物。
測(cè)定原理
NEX 在中性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與 3,5-二 硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在 540nm 處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還 原糖量成正比,通過測(cè)定反應(yīng)液在 540nm 吸光值增加速率,可計(jì)算 NEX 活力。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、恒溫水浴鍋,可見分光光度計(jì)、 1 mL 玻璃比色皿。
試劑組成和配制
緩沖液: 液體 20mL×1 瓶 ,4℃保存。
試劑一: 液體 5mL×1 瓶 ,4℃避光保存。
試劑二: 液體 25mL×1 瓶 ,4℃避光保存。
樣品處理
新鮮土樣風(fēng)干,過 30-50 目篩。
測(cè)定操作表
|
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
土樣(g) |
0.1 |
0.1 |
緩沖液 (μL) |
600 |
400 |
試劑一 (μL) |
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200 |
混勻,50℃震蕩反應(yīng) 30min,立即 90℃水浴 10min,8000g,25℃離心 10min,取上清 500μL |
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試劑二 (μL) |
500 |
500 |
混勻,90℃水浴中顯色 5min, 1mL 玻璃比色皿,對(duì)照管調(diào)零 ,測(cè)定 A540。 |
S-NEX 計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.6904x + 0.0058 ,R2 = 0.9989
酶活定義:50℃, pH6.0 條件下,每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生 1μmol 還原糖所需的酶量為一個(gè)酶活單位。
S-NEX 活力 (μmol/d/g 土樣)=(A540+0.0058)÷ 1.6904×V反總×103÷ W÷T÷150
=113.58×(A540+0.0058)÷ W
V反總:反應(yīng)總體積,0.6mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。
注意事項(xiàng)
1、保證震蕩反應(yīng) 30min,使酶與底物充分接觸。
2、注意 90℃水浴防止爆開,以免改變反應(yīng)體系。
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