伊人久久大香线焦|久久青青草国产第一页|亚洲国产九九九热视频|超乳视频爆乳无码免费专区|欧美日韩亚洲视频一区二区|少妇高潮惨叫喷水在线观看|亚洲区欧美区偷拍区中文字幕|国产日韩一区二区三区在线观看

H2S 含量測定試劑盒說明書（分光光度法）

貨號：LE-1-374

正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義

H2S 是一種新型氣態(tài)信號分子，存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì)，生理濃度的  H2S 對神經(jīng)系統(tǒng)海馬的 長時程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用，并對自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過 程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。

測定原理

H2S 與醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán)，亞甲基藍(lán)在 665nm 處有最大吸收峰，通過測定其吸光值可計算 H2S 含量。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 32mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 16mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑四：液體 16mL×1 瓶，4℃保存。

試劑五：液體 2.5mL×1 瓶，4℃避光保存。

樣品處理

1、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1 ：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織， 加入 1mL 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

2、細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴ 個）：提取液體積（mL）為 500~1000 ：1  的比例（建 議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000g ，4℃,離心 10min ，取上清置于冰上待測。

3、血清（漿）：直接測定。

操作表（取 2 mL 離心管，按照下表操作）

H2S 計算公式

標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：y = 0.0044x ，R² = 0.9988 

1、組織樣品

(1)按照蛋白濃度計算

H2 S（nmol/mg prot）=  ΔA÷0.0044×V 反總÷（V 樣×Cpr）=340.9×ΔA÷Cpr

(2)按照樣本重量計算

H2S（nmol/g 鮮重）=  ΔA÷0.0044×V 反總÷（V 樣÷V樣總×W）= 340.9×ΔA÷W

2、液體樣品

H2S（nmol/ml）=  ΔA÷0.0044×V 反總÷V 樣= 340.9×ΔA

3、細(xì)胞

H2S（nmol/10⁴ cell）= ΔA÷0.0044×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬個)）

=340.9×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量（萬個）

V 反總：反應(yīng)總體積，0.9mL；V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.6mL；V 樣總：加入提取液體積， 1mL；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/mL

注意事項：最低檢出限為 1nmol/mL。