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土壤酸性蛋白酶（S-ACPT）試劑盒(可見分光光度法)

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：液體60mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入10mL 蒸餾水充分溶解待用；

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入100uL 試劑七使粉劑潤(rùn)濕，然后加入20mL 試劑一， 轉(zhuǎn)入燒杯中沸水浴磁力攪拌溶解后待用；

試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入50mL 蒸餾水充分溶解待用； 

試劑五：液體10mL×1 瓶，4℃保存；

試劑六：液體1.5mL×1 支，0.05mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液，4℃保存； 

試劑七：液體1.5mL×1 支，4℃保存；

產(chǎn)品說明：

土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ACPT 在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。

酸性條件下，S-ACPT 可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；在680nm 有特征吸收峰。

所需儀器及設(shè)備：

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水。

操作步驟：

一、測(cè)定操作：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至680nm，蒸餾水調(diào)零。

2、試劑二、三和四 40℃水浴 10min。

3、樣本測(cè)定：

混勻，40℃水浴 30min，振蕩 5-6 次，使土樣與反應(yīng)液充分接觸

混勻，10000rpm 室溫離心 10min，取上清液

注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)一次。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

S-ACPT 活性計(jì)算：

單位定義：每天每g 土樣中產(chǎn)生1mg 酪氨酸為一個(gè)S-ACPT 活力單位。

S-ACPT(U/g)=C 標(biāo)準(zhǔn)×(A 測(cè)定管-A 對(duì)照管)÷A  標(biāo)準(zhǔn)管×V  反總÷W÷T=48×(A  測(cè)定管-A  對(duì)照管)÷A 標(biāo)準(zhǔn)管

C  標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.05mg/mL；V  反總：反應(yīng)體系總體積，0.4mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30min=1/48d；W：樣本質(zhì)量，0.02g。