產(chǎn)品名稱：土壤中性蛋白酶試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣,100管/48樣
產(chǎn)品貨號：LE-1-022,LE-2-022
產(chǎn)品報價：
免費咨詢：0551-66107970
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貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
檢測方法 |
規(guī)格 |
售價（元） |
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LE-1-022 |
土壤中性蛋白酶測試盒 |
可見分光光度法 |
50管/24樣 |
650 |
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LE-2-022 |
土壤中性蛋白酶測試盒 |
微量法 |
100管/48樣 |
1200 |
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體20mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入10mL試劑一，沸水浴攪拌溶解后待用；
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入10mL 蒸餾水充分溶解待用；
試劑四：液體40mL×1 瓶，4℃保存；
試劑五：液體10mL×1 瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體2mL×1 支，0.2 μmol/mL 酪氨酸溶液，4℃保存。
產(chǎn)品說明：
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。土壤中性蛋白酶在中性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。中性條件下，土壤中性蛋白酶可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)，在680nm 有特征吸收峰。
實驗中所需儀器及設(shè)備：
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL比色皿、蒸餾水、50目篩（或更?。?。
樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或 37℃烘箱風(fēng)干，過 30~50 目篩。
操作步驟：
1、分光光度計預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至680nm，蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測定：
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試劑名稱 |
測定管 |
對照管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
空白管 |
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風(fēng)干土樣（g） |
0.1 |
0.1 |
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試劑一（μL） |
100 |
100 |
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試劑二（μL） |
200 |
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混勻后，37℃反應(yīng)24h，期間振蕩5-6 次，使土樣與反應(yīng)液充分接觸。 |
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試劑三（μL） |
200 |
200 |
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試劑二（μL） |
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200 |
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混勻，10000rpm 室溫離心10min，取上清液 |
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上清液（μL） |
220 |
220 |
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標(biāo)準(zhǔn)液（μL） |
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220 |
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蒸餾水（μL） |
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220 |
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試劑四（μL） |
650 |
650 |
650 |
650 |
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試劑五（μL） |
130 |
130 |
130 |
130 |
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混勻，40℃水浴 10min，10000rpm 室溫離心 10min，取上清液于 680nm 下讀取各管吸光值 A， 分別記為 A 測定管、A 對照管、A 標(biāo)準(zhǔn)管、A 空白管，計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管，ΔA 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。 |
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注意：標(biāo)準(zhǔn)管、空白管只需測一次。每個測定管設(shè)一個對照管。
土壤中性蛋白酶活性計算：
單位定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol 酪氨酸為一個土壤中性蛋白酶活力單位。
土壤中性蛋白酶(U/g)=C標(biāo)準(zhǔn)×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V 反總÷W÷T= 0.1×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W。
C 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.2 μmol/mL；V 反總：酶促反應(yīng)總體積，0.5mL；T：反應(yīng)時間，1d；W：樣本質(zhì)量，g。
注意事項：
當(dāng)吸光值大于1時，建議將上清液稀釋后進(jìn)行測定，計算時注意乘以稀釋倍數(shù)。
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