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產(chǎn)品名稱:土壤熒光素二乙酸酯/FDA水解酶試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣

產(chǎn)品貨號(hào):LE-1-026,LE-2-026

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

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貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

售價(jià)(元)

LE-1-026

土壤熒光素二乙酸酯/FDA水解酶測(cè)試盒

可見(jiàn)分光光度法

50/24

560

LE-2-026

土壤熒光素二乙酸酯/FDA水解酶測(cè)試盒

微量法

100/48

1000

土壤熒光素二乙酸酯/FDA水解酶(FDA)試劑盒說(shuō)明書(shū)(可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)品內(nèi)容:

標(biāo)準(zhǔn)液:液體5mL×1 瓶,4保存。 

試劑一:液體50mL×1 瓶,4保存。 

試劑二:粉劑 1 瓶,-20避光保存,臨用前加 5mL 試劑三溶解。 

試劑三:液體 50mL×1 瓶,4保存。 

產(chǎn)品說(shuō)明:

FDA 水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化,是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。 

FDA 是一種無(wú)色化合物,在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解,并經(jīng)脫水反應(yīng),產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素,穩(wěn)定不易被分解,并在490nm處有強(qiáng)吸收峰,通過(guò)檢測(cè) 490nm 處的吸光值變化可計(jì)算得FDA水解酶活性。 

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 

天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。 

操作步驟:

一、樣本處理 

稱取風(fēng)干過(guò)30-50目篩土壤約 0.1g,備用。 

二、測(cè)定操作表 

 

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

對(duì)照管

測(cè)定管

樣本(g

 

 

0.1

0.1

標(biāo)準(zhǔn)液(μL

 

100

 

 

雙蒸水(μL

100

 

 

 

試劑一(μL

500

500

600

500

試劑二(μL

 

 

 

100

充分混勻,30,震蕩 1h

試劑三(mL

400

400

400

400

10000g,25,離心 5min,取 200μL 上清于微量石英比色皿/96 孔板中測(cè)定 490nm 處吸光值 A,A1=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管,A2=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。 

三、酶活性計(jì)算公式 

酶活性定義:每克土壤每天產(chǎn)生 1μmol 熒光素的量為一個(gè)酶活力單位。 

FDA 活性(μmol/d/g干重)=(△ A2÷△ A1×C 標(biāo)準(zhǔn)品)×V 反總÷T÷W

=2.4×(△ A2÷△ A1)÷W

C 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度 100μmol/L;V 反總:反應(yīng)總體積,1mL=1×10-3LT:反應(yīng)時(shí)間,1/24dW:樣本質(zhì)量,g

注意事項(xiàng):

1、盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品,否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。

2、測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請(qǐng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。


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