產(chǎn)品名稱:土壤熒光素二乙酸酯/FDA水解酶試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣,100管/48樣
產(chǎn)品貨號(hào):LE-1-026,LE-2-026
免費(fèi)咨詢:0551-66107970
貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
檢測(cè)方法 |
規(guī)格 |
售價(jià)(元) |
LE-1-026 |
土壤熒光素二乙酸酯/FDA水解酶測(cè)試盒 |
可見(jiàn)分光光度法 |
50管/24樣 |
560 |
LE-2-026 |
土壤熒光素二乙酸酯/FDA水解酶測(cè)試盒 |
微量法 |
100管/48樣 |
1000 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
標(biāo)準(zhǔn)液:液體5mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑 1 瓶,-20℃避光保存,臨用前加 5mL 試劑三溶解。
試劑三:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明:
FDA 水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化,是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。
FDA 是一種無(wú)色化合物,在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解,并經(jīng)脫水反應(yīng),產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素,穩(wěn)定不易被分解,并在490nm處有強(qiáng)吸收峰,通過(guò)檢測(cè) 490nm 處的吸光值變化可計(jì)算得FDA水解酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
操作步驟:
一、樣本處理
稱取風(fēng)干過(guò)30-50目篩土壤約 0.1g,備用。
二、測(cè)定操作表
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空白管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
樣本(g) |
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0.1 |
0.1 |
標(biāo)準(zhǔn)液(μL) |
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100 |
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雙蒸水(μL) |
100 |
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試劑一(μL) |
500 |
500 |
600 |
500 |
試劑二(μL) |
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100 |
充分混勻,30℃,震蕩 1h |
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試劑三(mL) |
400 |
400 |
400 |
400 |
10000g,25℃,離心 5min,取 200μL 上清于微量石英比色皿/96 孔板中測(cè)定 490nm 處吸光值 A,△A1=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管,△A2=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管 |
三、酶活性計(jì)算公式
酶活性定義:每克土壤每天產(chǎn)生 1μmol 熒光素的量為一個(gè)酶活力單位。
FDA 活性(μmol/d/g干重)=(△ A2÷△ A1×C 標(biāo)準(zhǔn)品)×V 反總÷T÷W
=2.4×(△ A2÷△ A1)÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度 100μmol/L;V 反總:反應(yīng)總體積,1mL=1×10-3L;T:反應(yīng)時(shí)間,1/24d;W:樣本質(zhì)量,g
注意事項(xiàng):
1、盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品,否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。
2、測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請(qǐng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
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