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土壤過氧化物酶（S-POD）活性檢測試劑盒說明書（可見分光光度法）

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：粉劑×2 瓶，臨用前每瓶加入10mL 蒸餾水，用不完的試劑仍4℃保存； 

試劑二：液體5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：液體10mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：乙醚 100mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

標(biāo)準(zhǔn)品：液體 10mL×1 瓶，4℃保存，相當(dāng)于每 mL 乙醚相中含有 0.1mg/mL 紫色沒食子素。

產(chǎn)品說明：

S-POD 主要來源于土壤微生物，能夠氧化土壤有機物質(zhì)產(chǎn)生過氧化物，在腐殖質(zhì)的形成過程中具有重要作用。S-POD 催化有機物質(zhì)氧化成醌，后者在430nm  有特征光吸收。

自備用品：

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、乙醚（不允許快遞）、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：

1、樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干，過30-50目篩。

2、標(biāo)準(zhǔn)品處理：將標(biāo)準(zhǔn)品用0.5 mol/L HCl溶液稀釋至0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0mg/mL。分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至430nm，0mg/mL管調(diào)零，測定標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度，根據(jù)吸光度和濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3、測定步驟：

4、S-POD 活力計算：

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將△A（x）帶入公式中計算出y值（mg/mL）。

單位的定義：每天每g 土樣中產(chǎn)生1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。

S-POD 活力（U /g  土樣）＝y(tǒng)×V提取相÷W÷T=840×y

T：反應(yīng)時間，1h=1/24d；V 提取相：提取相總體積 1.75mL；W：樣本質(zhì)量，0.05g。

注意事項：每個樣品均需做無基質(zhì)管。