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血鋅濃度檢測試劑盒說明書（微量法）

貨號：LE-2-256

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

鋅是必需的微量元素之一 ，在胰島素和卟啉代謝中也起重要作用。

測定原理：

在 pH 8.5~9.5 的溶液中，Zn²⁺與鋅試劑生成藍色配位化合物，在 620nm 有最大吸收峰。

試劑組成和配制：

試劑一：液體20ml×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體15ml×1 瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前 1 天配制，加入 15ml 無水乙醇充分溶解，蓋緊，過夜待用。4℃ 保存可穩(wěn)定約 1 個月，如顏色變黃，則已失效。

標準液：液體×1 支，10μmol/L Zn²⁺標準液。4℃保存。

自備儀器和用品：

離心機 、可調(diào)式移液槍 、可見分光光度計/酶標儀 、微量石英比色皿/96 孔板 、蒸餾水和無水乙醇。

測定操作：

1、分光光度計/酶標儀預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長到 620 nm，蒸餾水調(diào)零。

2、標準液解凍 ：提前取出標準液，置于室溫下充分解凍后混勻。

3、空白管 ：取 1.5 ml EP 管，依次加入 100 μl 蒸餾水， 100μl 試劑一 ，混勻；室溫， 13000g，離心 10min， 小心吸取上清液 100 μl，加入 0.5 ml EP 管，加入 100μl 試劑二，100μl 試劑三，充分混勻后 13000g 離心取 上清，吸取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板，620 nm 測定吸光度，記為 A 空白管。

4、標準管：取 1.5 ml EP 管，依次加入 100 μl 標準液，100 μl 試劑一 ，混勻；室溫，13000g，離心 10min， 小心吸取上清液 100 μl，加入 0.5 ml EP 管，加入 100μl 試劑二，100μl 試劑三，充分混勻后 13000g 離心取  上清，吸取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板，620 nm 測定吸光度，記為 A 標準管。

5、測定管：取 1.5 ml EP 管，依次加入 100 μl 血清，200 μl 試劑一 ，混勻；室溫，8000g，離心 10min，小 心吸取上清液 100 μl，加入 0.5 ml EP 管，加入 100μl 試劑二，100μl 試劑三，充分混勻后 13000g 離心取上 清 ，吸取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板，620 nm 測定吸光度，記為 A 測定管。

注意 ：空白管和標準管只需測定一次。

血鋅濃度計算公式：

血鋅濃度 (μ mol/L）=C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)

= 10×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)

C 標準液：10 μ mol/L Zn²⁺

注意事項：

1、試劑三需提前一天配制，如變黃色則不能再使用。

2、加入試劑三混勻后，要在 30 min 內(nèi)完成該管測定。

3、最低檢出限為 1μ mol/L。