果糖-1,6-二磷酸（FDP）試劑盒說明書(分光光度法) 

貨號：LE-1-237

正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義

果糖 1,6-二磷酸是機體內(nèi)的高能代謝物和代謝調(diào)控劑，是糖酵解途徑的重要中間體，廣泛存在于動植物和微生物體內(nèi)，能影響細胞內(nèi)鉀離子的濃度，改善葡萄糖和其他能量底物的代謝， 促進組織氧的釋放，廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)藥制劑。

測定原理

醛縮酶催化果糖 1,6-二磷酸降解，產(chǎn)物與 DNPH 縮合成紫紅色物質(zhì)，在 540nm 有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿。

試劑組成和配制

試劑一：液體 65mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 1mL×1 支，4℃避光保存。

試劑三：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑四：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。

樣品處理

1、組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1mL試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于 4℃，10000g 離心 10min，取上清待測。

2、細胞：按照細胞數(shù)量（10⁴ 個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1  的比例（建議 500萬細胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 4℃，10000g 離心 10min，取上清待測。

3、液體：直接檢測。

測定操作

計算公式

標準曲線：y= 0.6971x+0.0012，R²=0.9983

1、按照質(zhì)量計算

FDP（mg/g 鮮重）= (△A-0.0012) ÷0.6971÷（W÷V 樣總）

= 1.43×(△A-0.0012)÷W

2、按照細胞數(shù)量計算

FDP（mg/10⁴ cell）= (△A-0.0012) ÷0.6971÷（細胞數(shù)量÷V 樣總）

= 1.43×(△A-0.0012)÷細胞數(shù)量

3、按照液體體積計算

FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.6971

= 1.43×(△A-0.0012)

W：樣本質(zhì)量，g；V 樣總：加入提取液體積，1mL

注意事項：最低檢出限為 1.72 mg/L。