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植物銨態(tài)氮試劑盒說明書（分光光度法）

貨號：LE-1-309

正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

氮素是構成生物體的一種必需元素，自然界中的氮素循環(huán)包括許多轉化作用?？諝庵械牡獨?nbsp;被固氮微生物及植物與微生物的共生體固定成氨態(tài)氮，經過硝化微生物的作用轉化成硝態(tài) 氮，后者被植物或微生物同化成有機氮化物，植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。

測定原理

銨態(tài)氮在強堿性介質中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍，在 625nm 處有特 征吸收峰，吸光值與銨態(tài)氮含量成正比。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、分光光度計、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×2 瓶，4℃避光保存。臨用前根據用量每瓶加 15mL 蒸餾水溶解，現配現用。

試劑二：液體 30mL×1 瓶，4℃避光保存。

樣本處理

按照樣本質量（g）：提取液體積(mL)為 1 ：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 新鮮樣本，加入 1mL 提取液）室溫勻漿后，12000g  ，4℃離心 10min，取上清液待測。

測定操作表

1、分光光度計預熱 30min，調節(jié)波長至 625nm，蒸餾水調零。

2、操作表

計算公式

標準曲線：y= 0.0374x - 0.0623，R2= 0.9989；x 為標準品（NH4+）濃度μg/mL，y為吸光值△A。

NH4+—N 含量(μg/g 鮮重）=  (△A+0.0623）÷ 0.0374÷W×14÷ 18 

=20.8×  (△A+0.0623）÷W

W：樣本質量，g；14 ：N 的分子質量；18 ：NH4+ 的分子質量。

注意事項

1、試劑一必須避光低溫保存，配制好的試劑一 4℃保存不能超過 20 天。

2、提取好的待測液盡快測定，低溫保存不得超過 24 小時。